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Nageotte計(jì)數(shù)室推薦紅細(xì)胞制品白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法

NAGEOTTE COUNTING CHAMBER SUGGESTED METHOD FOR COUNTING LEUKOCYTES IN RED CELL PRODUCTS

1.0 SCOPE

1.1

這種計(jì)數(shù)方法描述了一種用于可視化計(jì)數(shù)白細(xì)胞的方法，這些白細(xì)胞存在于白細(xì)胞貧乏的血液或紅細(xì)胞包裝產(chǎn)品中。，

1.2該方法的靈敏度為0.1白細(xì)胞/毫升，應(yīng)用于白細(xì)胞耗竭的程序。

在Hausser計(jì)數(shù)室中將計(jì)數(shù)降低到低于5白細(xì)胞/升的水平。

2.0

設(shè)備，裝備

-具有大尺寸蓋板卡瓦（帶腔室）的NageFlowt計(jì)數(shù)室

-Turk溶液

10-100 pl吸管

-10-1000 Pl移液器

-10-1000PL吸管

~-12x75 mm塑料試管

配備20倍物鏡的實(shí)驗(yàn)室顯微鏡(10倍目鏡)

覆有濕濾紙的培養(yǎng)皿

3.0   程序，手續(xù)

3.1標(biāo)號(hào)試管。

3.2在每根管子上加入900 Pl的Turk溶液。

3.3在適當(dāng)標(biāo)記的試管中加入100 Pl，使每個(gè)樣品稀釋1：10。

多次沖洗吸管針尖，以確保樣品被轉(zhuǎn)移到稀釋劑中。

3.4用渦旋法將稀釋后的樣品混合均勻，靜置10分鐘(不超過(guò)1小時(shí))，將紅細(xì)胞溶解。

3.5.將稀釋后的樣品再次混合，取出：-600升加入吸管。小心地把蓋子放在一個(gè)干凈的，干燥的Nageotte室上。蓋子滑塊必須地集中在密室上。小心 加載Nageotte計(jì)數(shù)室，不干擾蓋的滑動(dòng)，直到它是滿(mǎn)的。從氣室一側(cè)加載，只為了防止空氣被困住。一次請(qǐng)勿打擾蓋子。 他的房間里裝了子彈。

3.6允許小室在潮濕的培養(yǎng)皿中休息15分鐘，使白細(xì)胞沉降。在30分鐘內(nèi)清點(diǎn)樣品。

3.7通過(guò)在網(wǎng)格區(qū)域來(lái)回掃描來(lái)計(jì)數(shù)白細(xì)胞。計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi)的所有白細(xì)胞(即40個(gè)矩形)，包括接觸所有線(xiàn)的細(xì)胞。

3.8在一個(gè)網(wǎng)格區(qū)域內(nèi)計(jì)算所有40個(gè)矩形-這是次計(jì)數(shù)。

3.9移至第二個(gè)柵格區(qū)(以上或低于已計(jì)算的區(qū)域)，并計(jì)算類(lèi)似的區(qū)域(3.7-3.8)。這是重復(fù)計(jì)數(shù)。

3.10計(jì)算白細(xì)胞/細(xì)胞使用下列公式：

揚(yáng)聲器細(xì)胞/pl=出售計(jì)數(shù)x稀釋體積計(jì)數(shù)(Ul)