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OncoImmunin專有技術(shù)

更新時間:2020-03-27      點擊次數(shù):1255

OncoImmunin專有技術(shù)

彩虹線

 

 

 

 

 
目標:解決方案:
子彈與細胞凋亡,細胞介導(dǎo)的細胞毒性,自噬,轉(zhuǎn)移,炎癥和病毒感染性有關(guān)的蛋白酶的肽底物。
新型的細胞和組織可滲透的熒光底物,可接觸活細胞和組織的所有環(huán)境。
子彈診斷細胞凋亡,細胞介導(dǎo)的細胞毒性,自噬,轉(zhuǎn)移,炎癥和病毒感染性。
子彈細胞和組織可滲透抑制劑,可抑制細胞凋亡,自噬,轉(zhuǎn)移,炎癥和病毒感染。
對細胞和組織可滲透底物的OncoImmunin設(shè)計的修改:蛋白酶識別位點上不可裂解的鍵的取代
子彈藥物輸送車
使用OncoImmunin的分子設(shè)計可實現(xiàn)細胞和組織的通透性
子彈將寡核苷酸引入活細胞和動物,特別是人類,而不會造成損害,傷害或毒性。

 

 

 

OncoImmunin,Inc.設(shè)計,合成,驗證并申請了專有的新型分子,可以用作熒光蛋白酶底物,用于測定活細胞以及血清寡核苷酸(例如siRNA)的體內(nèi)遞送酶活性,無毒性以及在溶液中表現(xiàn)出優(yōu)異性能后復(fù)活或小分子藥物在體內(nèi)試驗中均未通過

與其他熒光底物相比,OncoImmunin蛋白酶底物的優(yōu)勢是4倍:

子彈選擇熒光探針以確保不僅在溶液中而且在生物學(xué)樣品(例如血清,活細胞和組織)中準確測定酶活性。
子彈可以使用標準熒光顯微鏡觀察細胞內(nèi)蛋白酶的活性-無需任何修改! 
子彈為了確保特異性,所有底物均包含來自切割位點兩側(cè)的氨基酸序列,即從P n至P n '。
子彈底物在溶液中呈環(huán)狀構(gòu)象,可模仿天然存在的靶分子的活性位點環(huán)狀構(gòu)象。
 

OncoImmunin的熒光蛋白酶底物設(shè)計允許使用熒光顯微鏡確定細胞內(nèi)酶活性。緩沖液和人血清中活性的測定可以使用標準熒光計完成,或者對于大樣品通量,可以使用專有的高通量篩選(HTS)系統(tǒng)(請參閱頁面)

注-吸收率測量也是可能的。

要了解有關(guān)OncoImmunin,Inc.及其酶活性測定試劑盒的更多信息,請從下面的類別中進行選擇:

原理:熒光團的選擇;底物設(shè)計和切割;顯微鏡檢查
彈性蛋白酶底物:溶液測量;全細胞應(yīng)用
細胞凋亡檢測試劑盒:caspase-3(CPP32)和ICE;流式細胞儀 微粒

快來了!-用于鈣蛋白酶,纖溶酶原激活物和Xa因子的檢測試劑盒

 

熒光蛋白酶底物的基本原理

菜單

 

彩虹線

 

 

熒光團的選擇

進行熒光團的選擇,使得激發(fā)和發(fā)射都在可見波長范圍內(nèi)。選擇這種特定染料的理由是,生物材料包含在紫外線波長域中既吸收又發(fā)出熒光的分子。這種自發(fā)熒光會阻礙樣品中少量活性的測定,并降低活性測定的可靠性。

基板設(shè)計和計算機建模結(jié)構(gòu)

肽底物與共價偶聯(lián)的熒光團合成。后者在策略上遠離靶序列,以確保不干擾蛋白水解切割。

彈性蛋白酶底物的代表性計算機模型結(jié)構(gòu)如下所示,其中黃帶代表肽主鏈構(gòu)象,青色代表附著的熒光團。綠色箭頭表示切割位點。

顯示了該肽的兩個不同視圖。

 注意:首先,肽主鏈具有類似于
 SERPINs反應(yīng)位點環(huán)中發(fā)現(xiàn)的環(huán)構(gòu)象。

 第二,青色染料部分形成二聚體。這進一步穩(wěn)定
 了肽主鏈構(gòu)象??梢?br /> 通過形成非熒光基態(tài)二聚體來適合地描述這種分子構(gòu)型。

卵裂誘導(dǎo)的熒光和吸收變化

在完整的肽中,青色熒光團形成基態(tài)二聚體。該基態(tài)二聚體的吸收光譜可以用激子理論來適合地描述。肽裂解消除了這種染料與染料的相互作用,并導(dǎo)致熒光增加和吸收變化顯著。

 

彈性蛋白酶測定彩虹線

 

 

該彈性蛋白酶測定法可在多種條件下工作。在溶液或細胞懸液中進行測定。即使在顯微鏡下!

例如,一種應(yīng)用是使用熒光酶標儀篩選抗炎藥候選物。用豬胰彈性蛋白酶測定的該底物的Km在800 nM范圍內(nèi),而其他基于pNA和AMC生色團的生色底物的Km值分別為6.2和0.8 mM [請參見MJ Castillo,K. Nakajima,M [Zimmerman and JC Powers Anal Biochem 99:53-64(1979)]。

當您認為現(xiàn)在可以在您認為不可能的條件下測量彈性蛋白酶活性時,這確實是技術(shù)驅(qū)動型科學(xué)的一個例子。

沒有其他彈性蛋白酶檢測法是喜歡的!

敏感 - 與公里在NM-800,這是熒光,所有后
廣泛適用的 - 澄清溶液,血清,細胞懸浮液,或在顯微鏡載玻片上

從下面的應(yīng)用筆記中選擇:

溶液測量
全細胞

您也可以將這些熒光底物用于:

  1. 流式細胞儀分析
  2. 組織學(xué)冰凍切片

帶有支持數(shù)據(jù)的應(yīng)用筆記即將發(fā)布

凋亡測定和試劑彩虹線

 


要求特殊的介紹價格。
PhiPhiLux ®是美國專有技術(shù); 其他美國專有技術(shù)和PCT申請正在申請中。

與OncoImmunin的CaspaLux ® 基材,胱天蛋白酶的-1,6,8和活動-9可以被測量。此外,通過以互補色組合5種不同的底物,可同時通過流式細胞術(shù)和顯微鏡在活細胞中確定多種caspase活性。高通量分析也是可用的。 

披披士半胱天冬酶具有細胞滲透性的熒光底物有兩種顏色:(單擊圖標可下載協(xié)議)
半胱天冬酶綠色紅色
半胱天冬酶1onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -1 -電子1 d 2onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -1 -電子22
半胱天冬酶6onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -6 - J 1 d 2onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -6 - J 2 d 2
半胱天冬酶8onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -8 L - 1 d 2onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -8 L - 2 d 2
半胱天冬酶9onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -9 -中號1 d 2onc1_gr.gif(743字節(jié))CaspaLux ® -9 -中號22
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